如何防止培养过程中外植体的褐化和玻璃化
主要有下面两种原因:
①非酶促褐变--非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡,即坏死形成的褐变现象,并不涉及酚类物质的产生.诸多不利条件都可以造成细胞的程序化死亡。但这种褐变若采取适当措施或者愈伤组织适应了胁迫环境就不再发生。
②酶促褐变--多数认为,植物组织培养中的褐化现象主要是由酶促褐变引起的,即由多酚氧化酶作用于天然底物酚类物质而引起的。
有什么药品试剂,可以防止植物组织培养过程中的褐化现象?
某些抗氧化剂,比如聚乙烯吡咯烷酮(PVP),活性炭、柠檬酸、VC、间苯三酚等,不过你可以用PVP试试,在猕猴桃上有应用
组织培养过程中,外植体褐变的原因怎么防止?
植物基因型 木本植物比草本植物高更易发生褐变现象。
外植体的生理状态:成龄材料一般均比幼龄材料褐变严重。
取材时间:实验表明在苹果和核桃上,冬、春季取材褐变死亡率很低,夏季取材很容易褐变。
取材部位:幼嫩茎尖比其他部位褐变程度低。
培养基
无机盐浓度过高,导致褐变;
BA和KT不仅促进酚类化合物合成,而且刺激多酚氧化酶的活性,增加褐变;
生长素类如NAA和2,4-D可延缓多酚合成,减轻褐变。
液体培养褐变轻。
光照
温度 高温促进酚氧化,培养温度越高,褐变越严重
培养时间
材料培养时间过长,会引起褐变物的积累,加重对培养材料的伤害
植物组培外植体褐变与消毒剂
褐化的主要原因是植物本身,如果消毒剂过量植物变褐色是杀死材料造成的,上述消毒剂一般和酒精混合应用效果更好,酒精用表面消毒,本人一般就用升汞,升汞可以重复用,以免造成环境污染
如何防止组培过程中的褐化现象
从它产生褐化的原因入手。产生褐化原因及注意事项:1)本身产生的有毒物质;2)培养时间过长,营养物质缺乏。换新鲜培养基继代培养即可;3)取材原因:材料过嫩,经过度光照等不适原因损其活力,但仍具生命力,在之后愈伤组织中易褐化/取材不能过嫩;4)形成材料不能忍受的伤口,即伤害到了材料,如用锈刀处理材料形成的伤口/又是改用消毒的牙签处理形成伤口,但由于牙签较短,手距离平皿较近,易污染。
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